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分光光度計檢定中應注意的問題

JJG178-2007《紫外、可見、近紅外分光光度計》檢定規程將 JJG178-1996《可見分光光度計》、JJG375-1996《單光束紫外-可見分光光度計》、JJG682-1990《雙光束紫外可見分光光度計》、JJG689-1990《紫外、可見、近紅外分光光度計》4個規程合并為一個規程。合并工作主要從與建議接軌、適應現代化儀器發展的需要、減少規程數量、易于操作等方面出發，對 4個規程的檢測方法、指標要求、操作步驟等進行了整合。合并后的新規程涵蓋了所有類型分光光度計檢定的有關事項及計量技術指標，其較全面、詳盡的規定了檢定的有關內容。針對一些環境條件好，操作人員素質高的單位，檢定員按規程檢定，一般不會有問題，但對一些廠礦企業，或在儀器使用環境較差、人員素質普遍較低的情況下，檢定人員應注意一些問題。

1 檢定前，應粗略檢查儀器波長

分光光度計分析測量原理基于朗伯-比爾定律，其數學

表達式為 A =-1g(I/I0)= KLC

式中： A —物質的吸光度；I —透射的單色光強度；

I0—入射的單色光強度；K —物質的吸光系數；L —被分析物

質的光程；C —物質濃度。

朗伯-比爾定律適用的前提條件是單色光。從上式中可以看出，波長變化，將直接影響吸光度及物質濃度的變化。

由此可見，光的波長示值誤差在分光光度計檢定與使用中的

重要性。針對某些廠礦企業實驗室環境條件差、儀器使用頻

繁、易搬動、易出現故障的情況，檢定前，應先粗略檢查儀

器的光路，若無大問題，可進一步按照規程進行檢定，若不

符要求，可調試后再檢定，這樣可以提高工作效率，達到事

半功倍的效果。具體方法如下：

將儀器波長置于 580nm處，狹縫置于 2nm處，開啟鎢燈電源開關，打開試樣室蓋，用一張白紙插入參比光路或樣品光路中央，應在白紙上看到一個清晰、明亮、完整的橙黃色光斑，再打開氫燈，與上述方法一致，應看到一個亮度較暗的橙黃色光斑，當手調波長至長波方向時，應看到光斑顏色由黃變紅，接著當手調波長至短波方向時，應看到光斑顏色由紅變黃并向紫色變化。若儀器波長檢測能順利完成，則說明儀器光學系統基本正常，波長示值誤差在 2nm范圍以內。

 2 儀器波長調整后，一定要告知對方操作員

在定量分析中，許多企業的一線分析仍是采用標準曲線法。它是基于求得一組標準溶液所對應的吸光度與被測樣品的吸光度進行比較，而得到被測物含量的一種方法，也是zui經典的方法。在檢定中，如果發現儀器波長示值誤差，經調整后，儀器各項計量指標均符合 JJG178-2007的要求，檢定人員應告知對方使用人員重新繪制標準曲線，否則檢測結果將出現較大偏差。因為原標準曲線是在波長調整前繪制的，現在波長調整了，與原來相比吸光度將隨之發生變化，因此

需要從新配置系列標準曲線，繪制新的標準曲線。

 3 分光光度計透射比檢定過程中應注意的問題

分光光度計的透射比在檢定過程中經常會出現透射比示值超出規程要求的情況，那么這種狀況由何而起呢，經過多年的經驗，認為分光光度計透射比準確度示值誤差超差的原因大致如下：

3.1 波長示值誤差超差

在檢測儀器時一般先進行波長準確度的檢定，按要求將儀器波長調至合格，再進行透射比檢測即可解決波長示值誤差超差問題。

3.2 檢測器光門桿組件損壞

有些儀器在合上檢測室蓋板后，利用蓋板打開檢測器光門，長時間使用后會使光門組件損壞，使光門處于半開和狀態，用手輕壓蓋板，儀器示值會發生明顯變化，由于光門位置開合的不重復性導致透射比示值的重復性超差。此時對光門組件進行調整使光門能夠*打開，問題即可解決。

3.3 光源的光譜帶寬發生變化

分光光度計要求必須是一定的單色光，且每種儀器都應具有一定的光譜帶寬。一些儀器在使用或修理的過程中，有些非專業人員可能會誤對儀器的出射狹縫進行調整，從而導致儀器的光源單色性純度不夠，影響到儀器的透射比準確度。

遇到這類問題，檢測人員應與儀器的使用人員進行必要的溝通，詢問儀器的使用或修理過程，然后按照儀器的技術參數對狹縫進行重新調整，直到光譜帶寬符合要求為止。

3.4 檢測器的光電線性度不夠

儀器要求檢測器具有一定的光照線性范圍，但是，檢測器在使用中會出現鈍化現象，用的越久現象越嚴重，在低透射比時正常，而在高透射比時會表現出明顯的超差。遇到這類問題只有更換檢測器。

3.5 儀器顯示裝置發生問題

對一些使用指示類表頭的儀器，由于指針軸長期磨損使儀器靈敏度失靈，會發生卡滯現象，死區增大，手指輕敲，指針還會發生相應偏移。遇到這類問題只有更換新的表頭。

3.6 比色皿架位置發生偏移

比色皿架在工作中經常運動，發生位置偏差時光束不能*透過比色皿射入檢測器，而射在比色皿的邊緣部位，導致有效光能損失而使透射比失準。此時可對比色皿架底座的前后位置進行調整，使光束正好從比色皿架中央通過即可。

3.7 比色皿使用不當

在對分光光度計進行檢測時，要注意空白的石英比色皿在紫外區沒有吸收（或吸收較小），而玻璃比色皿在紫外去吸收較大，如果錯拿，則會給分析結果帶來粗大測量誤差。

另外，檢定人員也不要忽略對儀器配套使用的比色皿成套性的檢定，這也是造成儀器分析結果偏離的一個重要因素。主要是由于操作人員用于盛放參比溶液和樣品溶液的比色皿基本固定不變，從而造成盛放樣品的比色皿由于污染程度相對嚴重而使比色皿顏色變深，久而久之，兩個比色皿透射比出現較大誤差。對于這種情況，應告知操作人員，比色皿位置并非固定不變，可前后互置，并經常清洗，保證其成套性

誤差在 0.5%以內方可成套使用。

綜上所述，只是筆者作為檢定員在檢定過程中一些經驗的總結。當然，作為一名檢定員不僅應該透徹了解檢定規程的每一條款，熟練操作儀器，還要多學習一些與分析相關的基本知識技能以及理論。這樣，在實際工作中才能更好的服務企業，幫助企業解決實際困難。